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高致病性禽流感防治知识问答(之二)
http://bird.intopet.com 日期:2004-2-21 来源:中信网 作者:全国防治高致病性禽流… 阅读:
续的高水平抗体,保护家禽不发病。

  目前我国对疫点周围3公里内的家禽采取扑杀,疫区以外 5公里范围内的家禽采取紧急疫苗接种的措施来控制禽流感的流行。疫苗接种与扑杀相比在近期能降低经济损失,但遇到强毒攻击时,这些免疫的禽只虽然不表现发病症状,但是有可能因病毒不能从群体中被消除掉,而形成带毒免疫,所以,抓免疫的同时,还要抓扑杀,扑杀能彻底消灭传染源。

  41对水禽疫病的控制有哪些好的建议?

  水禽疫病的控制情况较鸡、鸽、鹌鹑等禽类的情况更为复杂。水禽疫病的控制,首先应作好养禽环境的消毒,水源的清洁和消毒;同时,水禽和鸡要分开饲养,以陆地圈养为好,尽量远离野鸟栖息地,减少与候鸟的直接接触。另外,还要规范水禽养殖的监管工作和对水禽市场的管理,并通过疫苗免疫和严格的消毒等措施对水禽疫病加强控制。

  四、高致病性禽流感的鉴定方法

  42国家禽流感参考实验室对这次高致病性禽流感最后确诊的依据是什么?

  以对疑似高致病性禽流感患病家禽流感病毒病原分离鉴定作为最后确诊的依据,即:

  (1)H5血凝抑制试验效价达到24以上,琼脂糖扩散试验阳性(水禽除外)。

  (2)在疫点送检的病样中分离到了N5N1亚型高致病性禽流感病毒。

  43是否出现异常死鸡就可以认为是禽流感?

  目前,在我国可以导致家禽包括鸡死亡的疫病较多,其中包括禽流感、新城疫、鸡马立克氏病、传染性支气管炎、传染性喉气管炎、传染性法氏囊病、大肠杆菌病、禽霍乱等;另外,其他因素如中毒或寄生虫等因素也可以导致家禽死亡。所以,家禽出现异常死亡就推断为禽流感是不科学的。

  44目前我国用于禽流感诊断的血清学技术有哪几种?

  其中哪些是OIE所规定的检测方法?主要有血凝试验、血凝抑制试验、琼脂扩散试验、神经氨酸酶抑制试验、酶联免疫吸附试验、病毒中和试验及免疫荧光试验等。其中血凝和血凝抑制试验、琼脂免疫扩散试验是OIE推荐使用的方法。

  45血凝和血凝抑制试验具体怎样操作和判定结果?

  血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验具体操作和结果判定程序如下:

  (1) 材料准备

  a96孔V型微量反应板,微量移液器(配有滴头)。b配制阿氏(Alsevers)液、鸡血红细胞悬液。cpH72的001摩尔/升磷酸盐缓冲液(PBS)。d高致病性禽流感病毒血凝素分型抗原和标准分型血清以及阴性血清。

  (2)操作方法

  ① 血凝(HA)试验(微量法)

  a在微量反应板的1~12孔均加入0025毫升 PBS,换滴头。

  b吸取0025毫升抗原加入第1孔,混匀。

  c从第1孔吸取0025毫升抗原加入第2孔,混匀后吸取0025毫升加入第3孔,如此进行对倍稀释至第11孔,从第11孔吸取0025毫升弃之,换滴头。

  d每孔再加入0025毫升 PBS。

  e每孔均加入0025毫升 1%(V/V)鸡红细胞悬液(将鸡红细胞悬液充分摇匀后加入)。

  f振荡混匀,在室温(20~25℃)下静置40分钟后观察结果(如果环境温度太高,可置4℃环境下1小时)。对照孔红细胞将呈明显的纽扣状沉到孔底。

  g结果判定。将板倾斜,观察红细胞有无呈泪滴状流淌。完全血凝(不流淌)的抗原或病毒最高稀释倍数代表一个血凝单位(HAU)。

  ② 血凝抑制(HI)试验(微量法)

  a根据血凝试验结果配制4HAU的病毒抗原。以完全血凝的病毒最高稀释倍数作为终点,终点稀释倍数除以4即为含4HAU的抗原的稀释倍数。例如,如果血凝的终点滴度为1∶256,则4HAU抗原的稀释倍数应是1∶64(256除以4)。

  b在微量反应板的1~11孔加入0025毫升 PBS,第12孔加入005毫升 PBS。

  c吸取0025毫升血清加入第1孔内,充分混匀后吸0025毫升于第2孔,依次对倍稀释至第10孔,从第10孔吸取0025毫升弃去。

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